狐貍源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒?通用原則

狐貍源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒通用原則:

1, 先選擇好探針,然后設(shè)計引物使其盡可能的靠近于探針。

2, 擴增子的長度應(yīng)不超過400bp,理想的*能在100-150bp內(nèi),擴增片斷約短,有效的擴增反應(yīng)就越容易獲得。較短的擴增片斷也容易保證分析的一致性

3, 保持GC含量在20%和80%之間,GC富含區(qū)容易產(chǎn)生非特異反應(yīng),從而會導致擴增效率的降低,及在SG分析中非特異信號。

4, 為了保證效率和重復(fù)性,應(yīng)避免重復(fù)的核苷酸序列,尤其是G(不能有4個連續(xù)的G)

5, 將引物和探針互相進行配對檢測,以避免二聚體和發(fā)卡結(jié)構(gòu)的形成。

b),探針設(shè)計指導

1,在設(shè)計引物之前設(shè)計探針

2,探針的Tm值應(yīng)在68-70℃之間,如果是目測探針,則要仔細審查GC富含區(qū)。

3,探針的5’端要避免有鳥氨酸,5’G會有淬滅作用,即使被切割下來這種淬滅作用也還會存在

4,選擇C多于G的鏈作探針,G的含量多于C會降低反應(yīng)效率,這時就應(yīng)選擇配對的另一條鏈作為探針。

6, 探針應(yīng)盡可能的短,不要超過30個bp。

7, 檢測探針的DNA折疊和二級結(jié)構(gòu)。

人角膜上皮細胞*培養(yǎng)基

人視網(wǎng)膜色素上皮細胞*培養(yǎng)基

人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基

人角膜成纖維細胞*培養(yǎng)基

人小梁網(wǎng)細胞*培養(yǎng)基

人視網(wǎng)膜muller細胞*培養(yǎng)基

人角膜內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基

人脈絡(luò)膜微血管細胞*培養(yǎng)基

人牙周膜成纖維細胞*培養(yǎng)基

大鼠肺微血管內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基

大鼠肺血管平滑肌細胞*培養(yǎng)基

大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞*培養(yǎng)基

大鼠氣管上皮細胞*培養(yǎng)基

大鼠氣管平滑肌細胞*培養(yǎng)基

大鼠肺成纖維細胞*培養(yǎng)基

大鼠支氣管上皮細胞*培養(yǎng)基

大鼠支氣管成纖維細胞*培養(yǎng)基

大鼠肺大靜脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基

大鼠肺大動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基

大鼠肺大動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基

大鼠肺動脈成纖維細胞*培養(yǎng)基

大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基

大鼠氣管和支氣管上皮細胞*培養(yǎng)基

大鼠胰島細胞*培養(yǎng)基

大鼠胰腺星狀細胞*培養(yǎng)基

大鼠胰腺導管上皮細胞*培養(yǎng)基

大鼠頜下腺上皮細胞*培養(yǎng)基

大鼠腮腺細胞*培養(yǎng)基

大鼠乳腺上皮細胞*培養(yǎng)基