人低氧誘導(dǎo)因子2ELISA試劑盒標(biāo)本的采集與保存:
1、血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2 小時(shí)或4oC 過(guò)夜,然后1000×g 離心20 分鐘,取上清即
可,或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2、血漿:用EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30 分鐘內(nèi)于2-8oC 1000×g 離心15 分鐘,
取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3、組織勻漿:
1) 取適量組織塊,于預(yù)冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,稱重后備用(組織塊較大需先剪碎后再勻漿);
2) 可同時(shí)選用多種勻漿方法達(dá)到較好的破碎效果:首先將組織塊移入玻璃勻漿器,加入5-10mL 預(yù)冷PBS 進(jìn)行充分研磨,該過(guò)程需在冰上進(jìn)行(有條件實(shí)驗(yàn)室可選用機(jī)器勻漿);得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復(fù)凍融進(jìn)一步處理(超聲破碎過(guò)程中注意冰浴降溫;反復(fù)凍融法可重復(fù)2 次)。
3) 將制備好的勻漿液于5000×g 離心5 分鐘,留取上清即可檢測(cè)。
4、其它生物標(biāo)本:請(qǐng)1000×g 離心20 分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
1000 人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 (HBMEC) ( 5×105 )
1100 人腦血管平滑肌細(xì)胞 (HBVSMC)( 5×105 )
1200 人腦血管周細(xì)胞 (HBVP) ( 5×105 )
1300 人脈絡(luò)絲內(nèi)皮細(xì)胞 (HCPEC)( 5×105 )
1310 人脈絡(luò)絲表皮細(xì)胞 (HCPEpiC)( 5×105 )
1320 人脈絡(luò)絲成纖維細(xì)胞 (HCPF)( 5×105 )
1400 人腦膜細(xì)胞 (HMC)( 5×105 )
1520 人神經(jīng)細(xì)胞(HN) (10×106 )
1530 人小腦顆粒細(xì)胞 (HCGC)( 5×105 )
1540 人海馬趾神經(jīng)細(xì)胞(HN-h)(1×106)
1600 人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(HOPC)(貼壁生長(zhǎng))
1610 人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(HOPC-os)(懸浮生長(zhǎng))
1620 人膠質(zhì)細(xì)胞(少突細(xì)胞)(HO) (1×106 )
1700 人雪旺細(xì)胞 ( HSC) ( 5×105 )
1710 人神經(jīng)系統(tǒng)周邊細(xì)胞 (HPNC)( 5×105 )
1800 人星形膠質(zhì)細(xì)胞 (HA) (1×106 )
1810 人小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞( Hac) (1×106 )
1820 人脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞(HA-sp)(1×106)
1830 人海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞(HA-h)(1×106)
1900 人小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(HM) ( 5×105 )
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