熒光pcr試劑盒的這些功能特性你都了解嗎?
瀏覽次數:655發布日期:2021-02-03
PCR即聚合酶鏈式反應,是指在DNA聚合酶催化下,以母鏈DNA為模板,以特定引物為延伸起點,通過變性、退火、延伸等步驟,體外復制出與母鏈模板DNA互補的子鏈DNA的過程。
熒光pcr試劑盒是一項DNA體外合成放大技術,能快速特異地在體外擴增一定長度的DNA段。可用于基因分離克隆,序列分析,基因表達調控,基因多態性研究等許多方面,且價格合適。
CP4-EPSPS是從土壤農桿菌 CP4 菌株中分離得到的抗除草劑草甘膦基因,是轉基因研究中為常用的一種篩選標記基因,因此本公司根據探針法 qPCR原理開發了專門用于檢測 CP4-EPSPS 的試劑盒,熒光pcr試劑盒具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板。
2. 根據 CP4-EPSPS 保守區域設計引物和探針,能專一性地檢測出樣品中的CP4-EPSPS 成分,但不能檢測其他非 CP4-EPSPS 成分。
3. 提供陽性對照,便于區分假陰性樣品。
4. 一管式閉管操作,降低了交叉污染。
5. 快速,整個檢測過程(按一個樣品計)所需時間僅為 2.0 小時。
6. 本只能用于科研,足夠50次20uL體系的探針法熒光定量PCR。
在高溫(94℃)下,待擴增的靶DNA雙鏈受熱變性成為兩條單鏈DNA模板;而后在低溫(37~55℃)情況下,兩條人工合成的寡核苷酸引物與互補的單鏈DNA模板結合,形成部分雙鏈;在普通Taq酶的適宜溫度(72℃)下,以引物3’端為合成的起點,以d NTP為原料,沿模板以5’→3’方向延伸,合成DNA新鏈。這樣,每一雙鏈的DNA模板,經過一次解鏈、退火、延伸三個步驟的熱循環后就成了兩條雙鏈DNA分子。
熒光pcr試劑盒這樣進行,每一次循環所產生的DNA均能成為下一次循環的模板,每一次循環都使兩條人工合成的引物間的DNA特異區拷貝數擴增一倍,PCR產物得以2n的形式迅速擴增,經過25~30個循環后,理論上可使基因擴增10 倍以上。