人ELISA試劑盒的檢測方法:基于酶聯免疫吸附技術
瀏覽次數:55發布日期:2024-12-10
人ELISA試劑盒是一種用于檢測特定蛋白質或細胞因子在樣本中含量的重要工具。其基本原理是利用酶聯免疫吸附技術(ELISA),通過特異性抗體與待測抗原的結合,實現對目標物質的定量分析。
-定義:人ELISA試劑盒是一種基于酶聯免疫吸附技術的檢測方法,通過特異性抗體與抗原結合,形成免疫復合物,進而通過酶標記和底物反應,實現對目標物質的定量檢測。
-原理:采用雙抗體夾心法,將特異性抗體預包被在高親和力的酶標板上,加入標準品和待測樣本后,再加入生物素化的檢測抗體,經過孵育和洗滌,加入酶標記的鏈霉親和素,通過顯色反應,顏色的深淺與樣本中目標物質的濃度成正比。
人ELISA試劑盒的主要組分:
-預包被板:通常為96孔或48孔板,預先包被了抗目標物質的單克隆抗體。
-標準品:用于制作標準曲線的已知濃度的目標物質溶液。
-檢測抗體:生物素標記的抗目標物質抗體。
-酶標記物:通常是辣根過氧化物酶(HRP)標記的鏈霉親和素。
-底物溶液:如TMB(四甲基聯苯胺),與酶反應產生顏色變化。
-終止液:通常為硫酸溶液,用于終止反應。
人ELISA試劑盒廣泛應用于醫學研究、臨床診斷和生物學實驗等領域,可用于檢測血清、血漿、細胞培養上清液等樣本中的多種蛋白質和細胞因子,如白細胞介素(IL)、腫瘤壞死因子(TNF)、轉化生長因子(TGF)、干擾素(IFN)等。這些指標在炎癥反應、免疫調節、細胞增殖和凋亡等方面具有重要意義。