標本的采集與保存:
1、血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2 小時或4oC 過夜,然后1000×g 離心20 分鐘,取上清即
可,或將上清置于-20oC 或-80oC 保存,但應避免反復凍融。
2、血漿:用EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30 分鐘內于2-8oC 1000×g 離心15 分鐘,
取上清即可檢測,或將上清置于-20oC 或-80oC 保存,但應避免反復凍融。
3、組織勻漿:
1) 取適量組織塊,于預冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,稱重后備用(組織塊較大需先剪碎后再勻漿);
2) 可同時選用多種勻漿方法達到較好的破碎效果:首先將組織塊移入玻璃勻漿器,加入5-10mL 預冷PBS 進行充分研磨,該過程需在冰上進行(有條件實驗室可選用機器勻漿);得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復凍融進一步處理(超聲破碎過程中注意冰浴降溫;反復凍融法可重復2 次)。
3) 將制備好的勻漿液于5000×g 離心5 分鐘,留取上清即可檢測。
4、其它生物標本:請1000×g 離心20 分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20oC 或-80oC 保存,但應避免反復凍融。
產品名稱:小鼠凝血因子ⅢELISA試劑盒
英文名稱: FⅢ ELISA Kit
規(guī)格 :48T/96T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本..
小鼠凝血因子Ⅲ英文名稱:FⅢ ELISA Kit產品別名:小鼠FⅢ elisa試劑盒用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。
公司采用全是進口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務,各種種屬ELISA試劑盒產品齊全,質量可靠。
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關,我司嚴格按照進行生產,已獲得國家承認的“三證”,每一個產品都有對應的生產批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產品,不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應微孔內的溫度較快地達到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內源性干擾因素:包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,可用加入到標本稀釋液中使RF降解;
補體的控制方法:
①用EDTA稀釋標本;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;
2.外源性干擾因素:包括標本溶血、細菌污染、保存時間過長或凝固不全等;
控制方法:采血時規(guī)范操作,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血;收集標本時采用無菌試管,經檢測后再低溫凍存;保存時間不宜過久,檢測時盡量采用新鮮標本;對于凝固不全的血標本可適當加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清。
以下是小鼠凝血因子ⅢELISA試劑盒的相關產品:
促尿鈉排泄肽前體C抗原人γ干擾素誘導蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試盒
多囊腎蛋白2抗體人干擾素誘導蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試盒
多囊腎蛋白1抗原人ω干擾素(IFN-ω/IFNB)ELISA試盒
”蛋白又稱“波克曼”蛋白人γ干擾素(IFN-γ)ELISA試盒
Podoplanin Protein 平足蛋白抗原人β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試盒
外周髓鞘蛋白-22多肽人α/β干擾素受體(IFN-α/βR)ELISA試盒
周圍神經髓鞘蛋白2抗原人α干擾素(IFN-α)ELISA試盒
peptide 酸化微管相關蛋白多肽人干擾素調節(jié)因子(IRF)ELISA試盒
peptide 酸化信號轉導與轉錄激活因子1抗原人干擾素誘導T細胞趨化因子(ITAC/CXCL11)ELISA試盒
petide 酸化Smad2抗原人干擾素活化基因205(Ifi205)ELISA試盒
抗原人細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試盒
peptide 酸化p21激活激酶4多肽抗原人細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試盒
小鼠凝血因子ⅢELISA試劑盒 peptide 酸化絲裂原活化蛋白激酶p38抗原人細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試盒
peptide 酸化細胞核因子/酸化k基因結合核因子抗原人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISA試盒
酸化腸道內富含的Kruppel樣因子5抗原人全段狀旁腺素(i-PTH)ELISA試盒 2-苯酰噻吩ELISA Kit for Human Peroxiredoxin-6
(4-苯基)苯烷人增殖相關蛋白2G4(PA2G4)ELISA試盒
六水合酸鎂銨ELISA Kit for Human Proliferation-associated protein 2G4
次酸鎳六水合物人哆/哆醇維生素B6激酶(PDXK)ELISA試盒
化釹六水合物ELISA Kit for Human Pyridoxal kinase
3--2-氧基砒啶人N酰基葡萄糖甘露糖轉移酶1(POMGNT1)ELISA試盒
5--2-氧基啶ELISA Kit for Human Protein O-linked-mannose beta-1, 2-N-acetylglucosaminyltransferase 1
5--2-氧基-3-基砒啶人脊髓灰質炎病受體相關蛋白1(PVRL1)ELISA試盒
3--2-氧基啶ELISA Kit for Human Poliovirus receptor-related protein 1
鎢酸鈉人哆/哆醇維生素B6酸酶(PDXP)ELISA試盒
2,6-二苯醇ELISA Kit for Human Pyridoxal phosphate phosphatase
3--2-羥基啶人5'-AMP-絲裂原活化蛋白激酶β1亞基(AMPK subunit beta-1)ELISA試盒
2-羥基-5-啶ELISA Kit for Human 5'-AMP-activated protein kinase subunit beta-1
化鋰水合物人polo樣蛋白激酶1(PLK1)ELISA試盒
3,5-二氟-4-異氧基苯酸ELISA Kit for Human Serine/threonine-protein kinase PLK1
ELISA 試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質包被的適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值i大而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
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