標本的采集與保存:
1、血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2 小時或4oC 過夜,然后1000×g 離心20 分鐘,取上清即
可,或將上清置于-20oC 或-80oC 保存,但應避免反復凍融。
2、血漿:用EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30 分鐘內于2-8oC 1000×g 離心15 分鐘,
取上清即可檢測,或將上清置于-20oC 或-80oC 保存,但應避免反復凍融。
3、組織勻漿:
1) 取適量組織塊,于預冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,稱重后備用(組織塊較大需先剪碎后再勻漿);
2) 可同時選用多種勻漿方法達到較好的破碎效果:首先將組織塊移入玻璃勻漿器,加入5-10mL 預冷PBS 進行充分研磨,該過程需在冰上進行(有條件實驗室可選用機器勻漿);得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復凍融進一步處理(超聲破碎過程中注意冰浴降溫;反復凍融法可重復2 次)。
3) 將制備好的勻漿液于5000×g 離心5 分鐘,留取上清即可檢測。
4、其它生物標本:請1000×g 離心20 分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20oC 或-80oC 保存,但應避免反復凍融。
產品名稱:小鼠丙酮酸激酶ELISA試劑盒
英文名稱: PK ELISA Kit
規格 :48T/96T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本..
小鼠丙酮酸激酶英文名稱:PK ELISA Kit產品別名:小鼠PK elisa試劑盒用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。
公司采用全是進口原材料研,發靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務,各種種屬ELISA試劑盒產品齊全,質量可靠。
?ELISA 試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質包被的適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值i大而蛋白量少的濃度。對于多數蛋白質來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關,我司嚴格按照進行生產,已獲得國家承認的“三證”,每一個產品都有對應的生產批號,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產品,不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑,值得您選擇。
2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應微孔內的溫度較快地達到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內源性干擾因素:包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等;
類風濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標本用聯有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,可用加入到標本稀釋液中使RF降解;
補體的控制方法:
①用EDTA稀釋標本;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;
2.外源性干擾因素:包括標本溶血、細菌污染、保存時間過長或凝固不全等;
控制方法:采血時規范操作,采集的血液勿用力震蕩,以防溶血;收集標本時采用無菌試管,經檢測后再低溫凍存;保存時間不宜過久,檢測時盡量采用新鮮標本;對于凝固不全的血標本可適當加入抗凝劑,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清。
以下是小鼠丙酮酸激酶ELISA試劑盒的相關產品:
β-環糊精標準品Anti-CD38 CD38抗體
γ-環糊精標準品Anti-CD38 CD38抗體
環己醇標準品Anti-CR1/CD35 Ⅰ型補體受體抗體(C3b/C4b受體抗體)
環硅油 4標準品Anti-CD36/PAS-4 CD36抗體
環硅油 5標準品Anti-CD4 CD4抗體
環硅油 6標準品Anti-CD7 CD7抗體
鹽酸環噴托酯標準品Anti-CD8 CD8抗體
環酰胺相關物質A標準品Anti-CD9/MRP-1 CD9蛋白抗體
環酰胺相關物質B標準品Anti-CD40L CD40L抗體
環酰胺相關物質C標準品Anti-Integrin alpha 2b/CD41 血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa抗體
環酰胺相關物質D標準品Anti-CD43/SPN CD43抗體
2-環基基-5-二苯標準品Anti-CD44/PGP1 CD44抗體
環絲酸標準品Anti-CD44v4 CD44V4抗體
環孢菌素標準品Anti-CD44v5 CD44V5抗體
環孢菌素分離度用混合物標準品Anti-CD44v6 CD44V6抗體 4-基-3-氟啶駱駝轉化生長因子β2 elisa試盒
Nefiracetam人酰胺腺嘌呤二核苷酸酸elisa試盒
4-羥基啶-2-羧酸大鼠基質金屬蛋白酶抑制因子4 elisa試盒
小鼠丙酮酸激酶ELISA試劑盒2-羥基苯酸酯大鼠基質金屬蛋白酶抑制因子3 elisa試盒
2-苯氧基苯酸人T細胞特異性鳥苷三酸酶elisa試盒
Gly-Phe-Asp-Leu-Asn-Gly-Gly-Gly-Val-Gly豬內皮型一氧化氮合成酶elisa試盒
2-基苯腈人Ⅰ型膠原交聯羧基末端肽elisa試盒
5-基-2,3-二啶兔金屬蛋白酶組織抑制因子1 elisa試盒
5-基-2-羥基-3-啶綿羊主要組織相容性復合體elisa試盒
Olaparib (AZD2281, Ku-0059436)雞N-酰-β-D-基葡萄糖苷酶elisa試盒
1-苊豬酸化細胞外信號調節激酶elisa試盒
4--3-氟芐醇大鼠Ⅰ型膠原交聯羧基末端肽elisa試盒
3-氟-4-啶大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2 elisa試盒
反式-4-氧基查耳大鼠絲酸/蘇酸蛋白酸酶elisa試盒
硬脂酸鎘人組織相容性復合體Ⅰ類相關基因B試盒elisa試盒
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