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小鼠心肌成纖維細胞提取物

  • 更新時間:  2020-07-06
  • 產品型號:  
  • 簡單描述
  • 小鼠心肌成纖維細胞提取物現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。
詳細介紹

培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備MEM培養基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。

小鼠心肌成纖維細胞提取物是從小鼠心肌成纖維細胞提取的,小鼠心肌成纖維細胞從正常小鼠心肌組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。

cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。

蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備小鼠心肌成纖維組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。

潛在的應用: <1>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標測序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質組學;<6>芯片研究與表達圖譜。

產品名稱

 小鼠心肌成纖維細胞提取物

英文名稱

Mouse Heart: Normal Heart Fibroblast Derivatives

貨號

CS-X3670

 


細胞分類:

一種:
是凍存產品,由氮直液接拿出,干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因為復蘇手法對于細胞狀態影響較大,一旦細胞狀態不好,很難說是細胞自身不行,還是復蘇沒操作好;另外溫度對細胞、基因功能狀態影響很大,也不是細胞儲存的方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產品的質量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種:
是我們復蘇好細胞,QC通過后,T-25灌滿培養基常溫運輸給客戶,排除復蘇造成影響,常溫運輸也對細胞影響也不大,只需加25元運費(順豐)。
質量保證:我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,進口來源,保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養的優點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
以下是公司正在銷售的相關產品: 

0.234ng/ml干擾素γ誘導單核因子(MIγ)檢測試盒(化學發光免疫分析法)PSTI

4.688ng/ml表皮調節素(EREG)檢測試盒(化學發光免疫分析法)PVUI

0.938ng/ml表皮調節素(EREG)檢測試盒(化學發光免疫分析法)PVUI

11.2pg/ml轉化生長因子β3(TGFβ3)檢測試盒(化學發光免疫分析法)PVUII

0.094ng/ml轉化生長因子β3(TGFβ3)檢測試盒(化學發光免疫分析法)PVUII, HC

0.094ng/ml轉化生長因子β3(TGFβ3)檢測試盒(化學發光免疫分析法)PVUII

9.375ng/ml 轉化生長因子β3(TGFβ3)檢測試盒(化學發光免疫分析法)SALI

0.094ng/ml白介素4誘導蛋白1(IL4I1)檢測試盒(化學發光免疫分析法)SALI

0.094ng/ml白介素4誘導蛋白1(IL4I1)檢測試盒(化學發光免疫分析法)SALI

0.188ng/ml干擾素誘導跨膜蛋白2(IFITM2)檢測試盒(化學發光免疫分析法)SDUI (BSP1286I)
小鼠心肌成纖維細胞提取物蛋白酶激活受體3(PAR3)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)高嶺土(醫藥級)

蛋白酶激活受體3(PAR3)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)硅藻土G(TLC)

神經介素S(NMS)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)硅膠(AR)

神經介素S(NMS)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)二氧化硅(99.99%,1-3mm)

神經介素S(NMS)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)石英砂(AR,6-10目或2-3mm)

凝酶/抗凝酶復合體(TAT)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)石英砂(AR,8-16目或1-2mm)

凝酶/抗凝酶復合體(TAT)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)95%醇(光譜純)

凝酶/抗凝酶復合體(TAT)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)二銨(SP)

纖溶酶/抗纖溶酶復合體(PAP)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)二化碳(光譜純,≥99.5%(GC))

管性友病因子(vWF)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)基叔基醚(ACS光譜級,≥99.8%(GC))

管性友病因子(vWF)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)1,4-雙[2-(2-基苯基)烯基]苯(99%)

管性友病因子(vWF)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)苯(光譜級, ≥99.7%)

凝因子Ⅹ(F10)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)環己(ACS光譜級,≥99.5%(GC))

凝因子Ⅹ(F10)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)四氯化碳(光譜純,≥99.0%)

凝因子Ⅹ(F10)檢測試盒(酶聯免疫吸附試驗法)二基亞砜(光譜級,>99.9% (GC))

 


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